每片烤烟任取一个半叶，沿着半叶的叶尖、叶中及叶基部等距离取5个点，用圆形打孔器打5片直径为15～20MM的圆形小片，将100片圆形小片放入水分盒中，85℃条件下烘干至恒重，冷却30Min后称重，计算叶质重。

制备新型壳聚糖-岩藻聚糖硫酸酯纳米粒子，测定不同岩藻聚糖硫酸酯/壳聚糖比例的纳米粒子在人工胃、肠液中的稳定性，寻找适用于运载口服药物的新型壳聚糖-岩藻聚糖硫酸酯纳米粒子。壳聚糖-岩藻聚糖硫酸酯纳米粒子已作为多种生物活性物质的运载体，如生长因子、抗肿瘤药物等。

1.2.3 单糖组成分析采用PMP柱前衍生高效液相色谱法测定SFP的单糖组成。为了防止药物进入肠道之前在胃中分解,纳米口服药物载体的构建需要考虑胃、肠道pH值的变化，使用对pH值敏感的载体系统。加入模拟胃液15mL(37℃预热)，置于恒温振荡器(37℃)中，分别在0，1，2，4，6h取出3mL反应液，在100℃水浴中灭酶，4000r/min离心10min，取离心后溶液2mL测定上清液中纳米微粒的粒径、Zeta电位、PDI等指标。近年来提出的纳米载药体系主要是利用具有一定特性的纳米载体，将药物包裹入内，提高其稳定性和利用率，现已成为国内外药剂学研究的热点圈。如何提高药物的口服利用率，构建口服药物载体。

壳聚糖是一种天然阳离子多糖，具有良好的安全性、生物相容性、pH值敏感性，可以通过增强细胞旁路的药物转运，促进药物的吸收利用，这使其在口服药物领域具有一定优势。Huang等将制备的壳聚糖-岩藻聚糖硫酸酯纳米粒子用于抗肿瘤药物姜黄素的运载，增加了姜黄素的生物利用度。3 讨论本研究分析了30个橡胶树HbHsf家族成员在低温胁迫下橡胶树93-114和热垦501叶片中的表达模式。

此外，小麦TaHsfC2a受高温胁迫上调表达，过表达TaHsfC2a可上调干旱和高温诱导基因的表达，提高转基因植株的耐热性。HbHsfA1a、HbHsfA1b、HbHsfA3a和HbHsfA4c响应高盐胁迫显著下调表达，其中HbHsfA1a、HbHsfA3a和HbHsfA4c在高盐处理中后期持续显著下调表达，而HbHsfA1b在高盐处理8h时极显著下调表达。OsHsfA4s在高盐胁迫后表达量上调。由此可见，橡胶树HbHsfA3b、HbHsfA4a以及HbHsfC亚家族成员可能参与氧化胁迫反应，保护细胞免受氧化损伤，提高橡胶树的抗逆性。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：胡萝卜，辣椒，半乳糖苷合成酶。在这2个不同耐寒性的橡胶树种质中都响应低温胁迫，但是响应程度不同。

小麦B2亚家族TaHsf3响应高温、低温、干旱和高盐的诱导，过表达该基因激活下游基因热激蛋白HSP70，从而提高拟南芥植株的耐热性和抗寒性。2.2 干旱对热激转录因子基因表达的影响在橡胶树30个Hsfs家族成员中，有28个成员响应干旱胁迫，只有HbHsfA1c和HbHsfA5b两个基因不响应干旱胁迫（图2）。而HbHsfA8a和HbHsfB2b的表达模式与之相反，它们在干旱处理的前期下调表达，在后期上调表达（图2）。2.3 高盐（NaCl）对热激转录因子基因表达的影响在橡胶树30个Hsfs家族成员中，有29个成员响应NaCl高盐胁迫，只有HbHsfA1c不响应高盐胁迫（图3）。

基因表达在不同组织中既有组织的特异性也有组织的相似性。草莓FvHsfA4a受低温和干旱胁迫上调表达。HbHsfA2a、HbHsfA4d、HbHsfA5a、HbHsfA9b、HbHsfB4a、HbHsfB4b和HbHsfB4d、在高盐处理的前期显著上调表达，在后期显著下调表达，与这些基因表达模式相反的基因HbHsfA8a和HbHsfB4c分别在高盐处理的前、中期显著下调表达，在中、后期显著上调表达。另外，在葡萄、胡萝卜和甘蓝等园艺植物中也发现VaHsfC1a、DcHsfC16和BraHsfC039受低温胁迫表达量显著上调。

水稻体内OsHsfC2a响应H2O2诱导表达量上调，可以提高水稻对氧化胁迫的敏感性和抵抗能力。在高盐处理的橡胶树93-114叶片中，HbHsfA2b、HbHsfA3b、HbHsfA4a、HbHsfA4b、HbHsfA5b、HbHsfA7a、HbHsfB1a、HbHsfB2a、HbHsfB2b、HbHsfB2c、HbHsfB3a、HbHsfB3b、HbHsfC1a和HbHsfC1b共14个基因响应高盐胁迫并呈持续显著上调表达模式，尤其HbHsfB2a和HbHsfB3a响应高盐胁迫上调幅度最大，在高盐处理2h时它们的转录水平是0h的2倍以上，对高盐胁迫比较敏感，而HbHsfA2b对高盐胁迫的反应比较滞后，在12h之前无响应，在处理24h时HbHsfA2b的表达迅速上调，几乎是0h的3倍。

在干旱处理的橡胶树93-114叶片中，HbHsfA3b、HbHsfA4a、HbHsfA4c、HbHsfA4d、HbHsfA5a、HbHsfA6a、HbHsfA7a、HbHsfA9a、HbHsfA9b、HbHsfB1a、HbHsfB3a、HbHsfB4a和HbHsfB4b共13个基因响应干旱处理并呈持续显著上调表达模式，其中HbHsfA7a、HbHsfA7a和HbHsfB4b的上调幅度较大，在干旱处理4h时它们的上调幅度是0h的3倍以上，对干旱胁迫比较敏感。OsHsfC1b在水稻抵抗高盐胁迫中起着重要的作用。

鹰嘴豆CarHsfB2在高温、高盐和干旱胁迫下上调表达，过表达CarHsfB2能够提高拟南芥植株的耐热性和抗旱性。水稻OsHsfA4d受低温胁迫后上调表达。水稻OsHsfC1a/b、OsHsfC2a/b在低温胁迫下表达量显著上调，其中OsHsfC1对低温胁迫最敏感。枇杷EjHsf1(A4)响应低温诱导，通过转录调控EjHsp基因参与提高枇杷抵抗低温胁迫能力。HbHsfA6a和HbHsfA9a在高盐胁迫前期先显著上调表达，然后显著下调，后期又显著上调表达（图3）。B1亚家族基因响应高温、干旱和高盐的诱导。

拟南芥体内的AtHsfA3受活性氧诱导表达量上调，过表达AtHsfA3的拟南芥植株中，该基因可直接结合肌醇半乳糖苷合成酶基因GolS1和GolS2的启动子从而激活GolS1和GolS2的转录，肌醇半乳糖苷的含量显著增加，利于清除羟基自由基，以免植物细胞受到逆境胁迫的伤害。尤其HbHsfA4a在低温胁迫下橡胶树93-114叶片和树皮中的表达量均显著高于热垦501。

由此可见，C亚家族成员在植物抵抗低温胁迫中也起着重要的作用。过表达CmHsfA4能够上调转基因菊花中CmHSP70、CmHSP90等基因的表达，提高SOD、APX、CAT等活性氧清除酶的活性，降低植物细胞内活性氧的含量，从而增强了转基因植株的抗逆性。

HbHsfA1b、HbHsfA2b、HbHsfA3a和HbHsfA4b响应干旱胁迫显著下调表达，其中HbHsfA1b和HbHsfA3a在干旱处理中后期持续显著下调表达，而HbHsfA2b和HbHsfA4b分别在干旱处理2h和24h时极显著下调表达，响应干旱胁迫的时间有明显差异。同源基因HbHsfA3b在高温、低温、干旱和高盐胁迫下的橡胶树93-114叶片中上调表达，HbHsfA9b响应高温、低温和干旱上调表达（图4）。

东南景天SaHsfA4c转基因拟南芥可激活ROS清除酶的活性和上调HSP的表达，降低活性氧的积累，从而增加植物对逆境胁迫的抗性。橡胶树HbHsfA4a和HbHsfA4d是EjHsf1、OsHsfA4和FvHsfA4a的同源基因，同样受低温、干旱和高盐胁迫后表达量上调表达（图4），另外，HbHsfA4a受高温胁迫上调表达，而HbHsfA4d受高温诱导下调表达。但是OsHsfB2b对水稻的抗旱性起负调控作用。草莓FvHsfA3a在高温、低温、干旱和高盐胁迫下上调表达，FvHsfA9a在低温和高盐胁迫下上调表达。

同源基因HbHsfB2b在高温、低温和高盐胁迫下的橡胶树93-114叶片中上调表达，HbHsfB1a响应高温、低温、高盐和干旱上调表达（图4）。拟南芥的AtHsfC1同样可被低温诱导，表达量极显著上调。

高温、低温、高盐、干旱等逆境常常会导致植物体内发生氧化胁迫。声明：本文所用图片、文字来源《热带植物学报》，版权归原作者所有。

而HbHsfB4c在干旱胁迫下先显著下调表达，然后显著上调，中后期又极显著下调表达（图2）。辣椒CaHsfA3/A9受高盐胁迫上调表达

OsHsfC1b在水稻抵抗高盐胁迫中起着重要的作用。枇杷EjHsf1(A4)响应低温诱导，通过转录调控EjHsp基因参与提高枇杷抵抗低温胁迫能力。B1亚家族基因响应高温、干旱和高盐的诱导。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：胡萝卜，辣椒，半乳糖苷合成酶。

辣椒CaHsfA3/A9受高盐胁迫上调表达。HbHsfB2a在干旱胁迫下先显著上调表达，然后显著下调，后期又极显著上调表达。

拟南芥体内的AtHsfA3受活性氧诱导表达量上调，过表达AtHsfA3的拟南芥植株中，该基因可直接结合肌醇半乳糖苷合成酶基因GolS1和GolS2的启动子从而激活GolS1和GolS2的转录，肌醇半乳糖苷的含量显著增加，利于清除羟基自由基，以免植物细胞受到逆境胁迫的伤害。由此可见，橡胶树HbHsfA3b、HbHsfA4a以及HbHsfC亚家族成员可能参与氧化胁迫反应，保护细胞免受氧化损伤，提高橡胶树的抗逆性。

在这2个不同耐寒性的橡胶树种质中都响应低温胁迫，但是响应程度不同。由此可见，橡胶树HbHsfA3b、HbHsfA4a、HbHsfA9b、HbHsfC1a、HbHsfC1b和HbHsfB2b等基因响应多种逆境交叉胁迫，暗示着上述基因功能的多样性和复杂性。